性交网站免费_老妇高潮潮喷到猛进猛_亚洲成av人无码_国产日韩无码一二区精品_国产熟女大屁股_日韩性爱四区_无码插_国产女人Av国产_九九综合在线_欧美色图激情小说_欧美熟妇另类久久久久久不卡_强奸乱伦中文字幕第一页_国产精品久久丝袜人妻_亚洲视频高清无码_国产情侣AV在线

技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 關于紫外交聯儀的使用步驟盡在本篇

關于紫外交聯儀的使用步驟盡在本篇

更新時間:2023-01-09   點擊次數:1838次
  紫外交聯儀的主要用途為在膜上交聯核酸,其是一種254mm紫外輻射系統,其有很多用途,UV滅菌消除PCR污染、嘧啶二聚體產生的部分限制性內切酶消化、RecA突變篩選以及瓊脂糖凝膠中DNA的切割等亦是其用途。其的應用價值也體現在聚合物紫外處理和紫外滅菌等方面。
 
  以下為紫外交聯實驗的步驟,一起來看看吧
 
  1、混合10μL含有高親和性蛋白結合位點的目的序列的單鏈M13載體和等摩爾的17bpM13通用引物,使用1×限制性內切核酸酶緩沖液調節終體積到100μL。在90攝氏度下加熱5分鐘。在室溫下冷卻、
 
  2、在雜交混合物中加入Klenow酶5μL、水7μL、10×限制性內切核酸酶緩沖液7.5μL、0.1mol/L二硫蘇糖醇1.75μL、50×dNTP/BrdU溶液3.5μL、[α32P]dCTP50μ等反應物,在16攝氏度下溫浴90分鐘。
 
  3、在68攝氏度下加熱10分鐘,將Klenow酶滅活。
 
  4、使用40U限制性內切核酸酶在合適條件下消化,使得20600bp的DNA片段產生。
 
  5、將乙酸銨添加到0.3mol/L,DNA使用2倍體積的1**%乙醇進行沉淀,在TE緩沖液中重懸。
 
  6、電泳在含有0.5μg/mL溴化乙錠的瓊脂糖凝膠上進行。所要的DNA片段使用DEAE膜進行分離。
 
  7、BrdU取代的DNA片段的特異活性使用閃爍計數器進行檢測,DNA的濃度的估計采用溴化乙錠點跡定量法。能夠采用遷移率變動DNA結合分析法來檢測探針的完整性和功能。
 
  8、將下列結合反應建立于1.5mL圓底小瓶中:將10-20μgDNA載體、經緩沖的含有結合蛋白的提取液以及105cpm均衡標記的探針混合,調節總體積到50μL。瓶口使用塑料薄膜封住,固定再采用Parafilm膜加封。
 
  9、在試管架上放上小瓶,于正上方5厘米處使用倒置的紫外透射燈照射1個小時。
 
  10、將1U微球菌核酸酶、DNA酶I4μg、0.5mol/LCaCl21μL等反應物加入到各結合反應管中,在37攝氏度下消化半個小時。
 
  11、在反應混合物中加入等體積的2×SDS樣品緩沖液,在100攝氏度中煮沸5分鐘。
 
  12、樣品的電泳在適當濃度的不連續SDS-聚丙烯酰胺凝膠上進行。
 
  13、完成電泳之后,將凝膠前沿的染料切去。
 
  14、干膠,使用增感屏放射自顯影13日,來對交聯的蛋白質進行觀測。
上海路陽儀器有限公司
上海路陽儀器有限公司
地址:上海市松江區新橋鎮泗磚南路255弄120號
主營產品:黑光燈,探傷燈,紫外交聯儀,實驗室高強度紫外線燈,熒光蛋白激發光源,GFP觀察燈,篩選轉基因熒光蛋白GFP激發光源,紫外線探傷燈,LED磁粉探傷燈,熒光檢漏燈,熒光檢漏劑,檢漏手電筒,脫脂檢測燈,熒光蛋白觀察燈

© 2025 版權所有:上海路陽儀器有限公司  備案號:滬ICP備10002130號-7  總訪問量:293970  站點地圖  技術支持:化工儀器網  管理登陸

97大香蕉久久久| 啊啊啊啊啊啊在线| 熟女激情16P| 亚洲人户外性猛交| 亚洲人与牲在线观看| 亚洲欧美日韩操| 大香蕉75依人在线| 丰满少妇啪啪插| 亚洲AV无码久久蜜| 色色综合五月天婷婷| 欧美a片在线一区| 欧美又粗又大操视频| 快猫淫欲| 亚洲无码99高清| 色呦呦精品1精品2| 久久久国产17c| 滑油少妇| 奇米AV第四色| 91免费A P P| 久久无码人妻一二三区| 好色日本中文字幕不卡| 呦呦在线免费观看视频| 97热热影院| 天天干天天操天天日天天射| 97秋霞不用| 少妇操69p| 亚洲天堂中文| 后入视频啊啊啊在线观看| 精品人妻无吗一区二区| 超碰9791熟女国产| 亚洲一级片又粗又大| 在线无码播放| 亚洲小说激情| 色欲色综合网站av| 东京热综合久久免费| 一起草一区免费在线播放| 色五月人人射| 亚洲第一网站都懂| 无遮挡操女人B在线观看| 久久草国产一区二区三区| 欧美在线无遮挡| 亚洲人妻大香蕉强上少妇| 另类激情五月天| 色播中文字幕| 天天日天天干夜夜夜| 亚洲黄色av毛片在线观看| 欧美色俺去啦| 超碰碰五月丁香| 东京热五月婷婷| 在线无码名星AV| 日本性爱小说| A 片东京热AV| 亚洲青青草色情网| AV天堂k在线| 亚洲大神自拍系列| 啊国产好爽| 大香蕉在线久草| 精品亚洲晶品资源91中中文| 色情五月天磁力| 久人人爽视频| 无码精品中文字幕| 日韩精品第42页| 久草福利免费在线播放| 成人AV婷婷| 奇米av情色| 国产乱伦熟女| 大香蕉天堂在线| 四虎影城| 999久久一区| avtt.久| 免费色色网| 91无码91精品| 無修正 五十路| 91超踫人人| 超碰黑丝淑女| 天堂色无码| 91性爱日本| 国产又黄又猛又粗又长| 亚洲情色导航| 第一页成人| 欧美涩涩涩涩| 本土情侣 啪啪 91| 国产精品久久久乱码| 欧美天天肏屄网| 中文,欧美一本道| 色激情五月天| 黑人插逼| 黄色视频网站精品一二区|